SREBF1核内結合因子取得 実験1
細胞:3T3-L1-TetON-FLAG-mnSrebf1
(99%分化, Day4)
薬剤処理:10ug/ml Doxycycline, 30hr
Lysate量:500ul/6cm dish
免疫沈降
・Lysate:250ul
・beads:10ul slurry
SDS-PAGE
サンプル量
・Lysate:3.3ul
・beads:1/10量(Lysate 25ul相当)
・eluate:1/10量(Lysate 25ul相当)
ゲル濃度:10%
ウェスタンブロット
・一次抗体:anti-FLAG M2-HRP (Sigma, A8592, Lot 093K9158), 1000倍希釈, R.T., 1hr
・発光:Pierce Western Blotting Substrate Plus
・検出:Amersham Hyperfilm ECL, 1min
