SREBF1核内結合因子取得 実験1

細胞:3T3-L1-TetON-FLAG-mnSrebf1 (99%分化, Day4)
薬剤処理:10ug/ml Doxycycline, 30hr
Lysate量:500ul/6cm dish
免疫沈降
 ・Lysate:250ul
 ・beads:10ul slurry
SDS-PAGE
 サンプル量
  ・Lysate:3.3ul
  ・beads:1/10量(Lysate 25ul相当)
  ・eluate:1/10量(Lysate 25ul相当)
 ゲル濃度:10%
ウェスタンブロット
 ・一次抗体:anti-FLAG M2-HRP (Sigma, A8592, Lot 093K9158), 1000倍希釈, R.T., 1hr
 ・発光:Pierce Western Blotting Substrate Plus
 ・検出:Amersham Hyperfilm ECL, 1min