Advantage2使用法

変異は入り易いが、増幅能力が強い酵素 (Advantage2>Ex Taqの例)

1. 次の試薬を氷上で混ぜる

DNAサンプル	適 量
50x Advantage2 Polymerase Mix (Clontech, S1798)	0.5ul
10x Advantage 2 PCR Buffer (Clontech, S1799)	2.5ul
dNTP Mixture 2.5mM each (TaKaRa)	2ul
Primer 100uM	各0.05ul
MilliQ	up to 25ul
Total	25ul

2. GeneAmp PCR System 9700 (Applied Biosystems)を次のように設定する

95℃	1min
95℃	30sec	↓
温度55℃-65℃ (アニーリング温度)	30sec
68℃	1min/1kb	↑20-40サイクル
68℃	3min
4℃	∞

3. プログラムをスタートさせ、95℃まで上がりきったらサンプルをセットする