CEBPAの抗体架橋による免疫沈降

結論
　・rabbit anti-CEBPA (14AA)は抗体架橋しても免疫沈降に使える

細胞：3T3-L1 adipocyte (Day3, 80%分化), 10cm dish 1/2枚
トランスフェクション
　plasmid：pcDNA-FLAG-CEBPA, 4ug
　lipofectamine 2000：30ul
　細胞回収までの時間：46hr
免疫沈降
　方式：抗体架橋
　抗体
　　・rabbit IgG, 3ug
　　・rabbit anti-CEBPA (14AA) (Santa Cruz, sc-61), 3ug
SDS-PAGE
　ローディング量：10cmディッシュ1/18枚分
ウェスタンブロット
　一次抗体
　　A：rabbit anti-FLAG (Sigma, F7425), 1/1000希釈
　　B：rabit anti-CEBPA (14AA) (Santa Cruz, sc-61), 1ug/ml
　二次抗体：anti rabbit Ig (Dako, P0448), 1/3000希釈
　発色液：Pierce ECL
　コンタクト時間：30min