CEBPAとPHF2の共発現

結論
 ・CEBPAと蛋白Pを同時に強制発現させても、CEBPAは発現するが、蛋白Pは発現しない

細胞:3T3-L1 (80% confluent) 6cm dish 1枚
トランスフェクション
 plasmid:pcDNA-FLAG-hCEBPA 4ug + pcDNA-HA-human蛋白P 4ug
 lipofectamine 2000:20ul
 細胞回収までの時間:2日間
SDS-PAGE
 ローディング量:10cmディッシュ1/225枚分
 ゲル濃度
  left panel:10%
  right panel:8%
ウェスタンブロット
 一次抗体-二次抗体-発色液-コンタクト時間
  left panel:rabbit anti-FLAG (Sigma, F7425), 1/1000希釈 - anti rabbit Ig (Dako, P0448), 1/3000希釈 - Pierce ECL - 30min
  right panel:rabbit anti-human蛋白P, 0.44ug/ml - anti rabbit Ig (Dako, P0448), 1/3000希釈 - SuperSignal West Femto - 10min