Hypoxanthine/Xanthine oxidaseのinsulin signalに対する作用

細胞：3T3-L1 (Day6, 95%分化)
処理条件：DMEM(H)/FBS(-)で1回wash→0.6mM hypoxanthine/10mU/ml xanthine oxidase/DMEM(H)/FBS(-), 23hr
回収条件：aprotinin/leupeptin/PMSF/Na3VO4
Western条件
　・ローディング量：5.4ug
　・ゲル濃度：12%
　・blocking：40min
　・1st Ab：室温, 3hr
　　・pAkt：Phospho-Akt(Ser473) Antibody (Cell Signaling, 9271, Lot 12), 1/1000希釈
　　・total Akt：Akt Antibody (Cell Signaling, 9272, Lot 22), 1/6000希釈
　・2nd Ab：Anti-rabbit Ig (GE, NA9340V, Lot 4654409), 1/2000希釈, 室温, 80min
　・develop：Pierce Western Blotting Substrate Plus, 1min