レーザーマイクロダイセクションからのRNA抽出

1. 遠心機を24℃にしておく。
2. Buffer RLT 1mlに対し、2-Mercaptoethanol (nacalai, 21418-42) 10ulを加える。
3. 組織片にBuffer RLT 345ul、4ng/ul carrier RNA 5ulを加え、vortex 30sec。
4. 70%エタノール350ulを加え、vortex
5. RNeasy MinElute spin columnにサンプルを加え、8000g, 24℃, 1min遠心し、flow throughを捨てる。
6. Buffer RW1 350ulを加え、8000g, 24℃, 1minし、flow throughを捨てる。
7. Buffer RDD 70ulに対し、DNase I stock solution 10ulを加え、DNase I incubation mixとする。
8. カラムにDNase I incubation mix 80ulを加え、R.T. 15min。
9. Buffer RW1 350ulを加え、8000g, 24℃, 1minし、flow throughを捨て、新しい2mlチューブにセットする。
10. RNase-Free Waterで80%エタノールを調製し、500ulを加え、8000g, 24℃, 2min。
11. flow throughを捨て、新しい2mlチューブにセットし、蓋を開け、13000g, 24℃, 5min。
12. カラムを1.5mlチューブにセットし、RNase-Free Water 14ulを加え、蓋を閉め、13000g, 24℃, 1min (-30℃に保存可)。