Namptノックダウン 実験2
細胞:3T3-L1 (Day6, 98%分化)
処理条件:siRNA reverse
transfection→23時間後培地交換(抗生物質+)→24時間後PBSで1回wash→DMEM(H)/±10%FBSで1-23hr培養
siRNA条件
siRNA
・negative control:AllStars Negative Control siRNA (QIAGEN, 1027280)
・siNampt:Mm_Pbef1_5 (QIAGEN, SI02674329)
・siAdipoq:Mm_Acdc_1 (QIAGEN, SI00185976) (ACCCTATAATGTAAATATGAA)
transfection
・10cm 1枚→12well 1枚
・siRNA:40pmol
・Lipofectamine RNAiMAX Reagent:2ul
・Opti-MEM :200ul
・培地:抗生物質(-)
Adipoq ELISA
・希釈倍率:505倍
