PPARGの強制発現

結論：PPARGは過剰発現可能

細胞：HEK293T (70% confluent), 10cm dish 1枚
トランスフェクション
　plasmid
　　・pcDNA-HA (Mock), 24ug
　　・pcDNA-FLAG-hPPARGv2, 24ug
　lipofectamine 2000：60ul
　細胞回収までの時間：49hr
　細胞のviability：明らかな細胞の浮遊、細胞死、増殖抑制を認めた
免疫沈降
　ビーズ：Anti-FLAG M2 Affinity Gel (Sigma, A2220), 20ul
　溶出：sample buffer
SDS-PAGE
　ローディング量：10cm dish 1/600枚分
ウェスタンブロット
　一次抗体：rabbit anti-FLAG (Sigma, F7425), 1/1000希釈
　二次抗体：anti rabbit Ig (Dako, P0448), 1/3000希釈
　発色液：Pierce ECL
　コンタクト時間：1min