H295R-TetON-Srebf2樹立
細胞:H295R-TetON
トランスフェクション
・GP2-293:4 x 10^6/10cm collagen dish→25hr後、80% confluent
・plasmid
・pRetroX-Tight-Pur-FLAG-mnSrebf1v1
・pRetroX-Tight-Pur-FLAG-nSrebf2
・lipofectamine 2000:20-40ul
・培養時間:45hr
感染
・GP2-293 10cm x 1枚→H295R-TetON 10cm x 1枚
・培養時間:1 day
・薬剤選択:5ug/ml puromycin + 800ug/ml G418
結果
・薬剤選択後16日目
・Srebf1, lipofectamine 20ul:1.1 x 10^6個
・Srebf1, lipofectamine 40ul:3.5 x 10^6個
・Srebf2, lipofectamine 20ul:0.9 x 10^6個
・Srebf2, lipofectamine 40ul:2 x 10^6個