H295R-TetON-Srebf2樹立

細胞:H295R-TetON
トランスフェクション
 ・GP2-293:4 x 10^6/10cm collagen dish→25hr後、80% confluent
 ・plasmid
  ・pRetroX-Tight-Pur-FLAG-mnSrebf1v1
  ・pRetroX-Tight-Pur-FLAG-nSrebf2
 ・lipofectamine 2000:20-40ul
 ・培養時間:45hr
感染
 ・GP2-293 10cm x 1枚→H295R-TetON 10cm x 1枚
 ・培養時間:1 day
 ・薬剤選択:5ug/ml puromycin + 800ug/ml G418
結果
 ・薬剤選択後16日目
  ・Srebf1, lipofectamine 20ul:1.1 x 10^6個
  ・Srebf1, lipofectamine 40ul:3.5 x 10^6個
  ・Srebf2, lipofectamine 20ul:0.9 x 10^6個
  ・Srebf2, lipofectamine 40ul:2 x 10^6個