Armc5 核内結合因子取得
細胞:Day3-4, 95% confluent
・3T3L1-TetON-FLAG
・3T3L1-TetON-FLAG-mArmc5
・3T3L1-TetON-FLAG-mArmc5ΔC
Doxycycline:10ug/ml, 22-32hr
核抽出
・ペレット量
・FLAG:3.5ml
・Armc5:3ml
・Armc5ΔC:3.5ml
免疫沈降
・蛋白分解阻害剤:cOmplete
・ビーズ量:60ul slurry
・反応時間:7.5hr
・洗浄:Buffer D 7回→Elute Buffer 3回
結果
・解析1回目
・解析2回目(インプット2倍)