Armc5 MG132処理

細胞
 ・HEK293T
 ・前日:0.6 x 10^6/6cm→培養22hr
 ・当日:70% confluent
トランスフェクション
 ・プラスミド:3ug/dish
  ・pcDNA3.1-FLAG-mArmc5
 ・lipofectamine 2000:8ul/dish
 ・培地交換までの時間:4hr
薬剤処理:トランスフェクションから23hr後、10uM MG132 (Sigma, M7449)を培地交換して処理
蛋白調製
 ・蛋白分解阻害剤:Proteinase Inhibitor Cocktail (Nacalai)
ウェスタンブロット
 ・ゲル:10%
 ・ローディング量:3%
 ・一次抗体:anti-FLAG M2-HRP (Sigma, A8592, Lot: 093K9158), 1/1000希釈, 4℃, over night