Armc5 MG132処理
細胞
・HEK293T
・前日:0.6 x 10^6/6cm→培養22hr
・当日:70% confluent
トランスフェクション
・プラスミド:3ug/dish
・pcDNA3.1-FLAG-mArmc5
・lipofectamine 2000:8ul/dish
・培地交換までの時間:4hr
薬剤処理:トランスフェクションから23hr後、10uM MG132 (Sigma, M7449)を培地交換して処理
蛋白調製
・蛋白分解阻害剤:Proteinase Inhibitor Cocktail (Nacalai)
ウェスタンブロット
・ゲル:10%
・ローディング量:3%
・一次抗体:anti-FLAG M2-HRP (Sigma, A8592, Lot: 093K9158), 1/1000希釈, 4℃, over night
