〇Buffer C

1. 次の試薬を混ぜる。

1M HEPES-KOH (pH 7.5)	100ul
0.5M EDTA (pH 8.0)	2ul
1M MgCl2	7.5ul
33% Glycerol	3750ul
超純水	1140.5ul
Total	5ml

2. Protease inhibitor cocktail (Nacalai, 25955-11) 50ulを加える。

1. 次の試薬を混ぜる。

		終濃度
1M HEPES-KOH (pH 7.5)	1ml	20mM
0.5M EDTA (pH 8.0)	20ul	0.2mM
1M MgCl2	75ul	1.5mM
Glycerol (nacalai, 17018-25)	12.5ml	25%
超純水	36.405ml
Total	50ml

2. 使用直前に、Aprotinin 71.5ul、10mg/ml Leupeptin 50ul、100mM PMSF 500ulあるいは、cOmplete Mini, EDTA-free (Roche, 11836170001) 5粒を加える。