〇細胞蛋白抽出　TNE Buffer　3T3-L1脂肪細胞

1. 培地をアスピレートし、PBS 5ml【2ml】〔1ml〕でwashする(-80℃で保存可)。
2. 冷やしたTNE(proteinase inhibitor +) or RIPA Buffer (proteinase inhibitor +) 1ml【500ul】〔200ul〕を加え、セルスクレイパーで1.5mlチューブに回収し、on ice。
3. (必要に応じ) sonication
4. rotation, 4℃, 30-50min。
5. 12000g, 4℃, 15min遠心し、中間層を回収する(目的に応じ、-80℃に保存可)。
6. サンプルバッファーを加え、インキュベート95℃, 5min (-30℃に保存可)。