〇CHO Armc5 CRISPR 設計3 cholesterol depletion

細胞
 種類
  ・CHO
  ・CHO-Armc5-KO-4
  ・CHO-Armc5-KO-5
 密度
  ・2 x 10^5/12ウェル→翌日、CHO: 90% confluent, CHO-Armc5-KO-4: 75% confluent, CHO-Armc5-KO-5: 60% confluent

処理:DMEM/F12でwash x 2回→培地交換→16hr後、cholesterol-methyl-β-cyclodextrin (50ug/ml cholesterol含有)処理→8hr後、細胞回収
 ・10% FBS
 ・10% LPDS + 2.5ug/ml Simvastatin + 100uM Mevalonate

RNA抽出:Sepasol

結果