〇CHO Armc5 CRISPR 設計3 作製
トランスフェクション
・細胞:CHO (6cm, 20% confluent)
・プラスミド
・プラスミド1:2.5ug/dish
・pCCC
・pCCC-cArmc5-2
・プラスミド2:2.5ug/dish
・pCCC-cArmc5-2
・EF1-Hygro-cArmc5-3
・Lipofectamine 2000:12.5ul/dish
・Opti-MEM:1ml/dish
経過
・Day1:50% confluent、400ug/ml hygromycin処理
・Day5:pCCC-Carmc5-2群は全滅
・Day9:pCCC-cArmc5-2+EF1-Hygro-cArmc5-3群は60% confluent、pCCC+EF1-Hygro-cArmc5-3群は15% confluent。1cell/96well x 2枚に限界希釈。
結果
・14クローン取得
・PCR結果
