〇CRISPR-Cas9　ノックアウト細胞作製

1. CHO細胞にトランスフェクションする。
2. ハイグロマイシンでselectionする。
3. 96ウェルプレートに1細胞/wellで限界希釈する(限界希釈した溶液はピペッターではなく振とうで撹拌する。ピペッターに細胞がくっつく可能性がある)。
4. Trypsin-EDTA 50ulを使用し、12ウェルプレートに継代する。
5. 半分をDNA抽出用に6ウェルに継代し、残りを凍結保存する。