〇制限酵素処理
ポイント
・NEBuffer 2は、Buffer M (TaKaRa)で代用可能
・NEBuffer 3は、Buffer H (TaKaRa)で代用可能
・一部の制限酵素(BamHI-HFなど)は電気泳動中もDNAに結合するので、SDS入りのゲルローディングバッファーを用いる(ローディングバッファーで移動度が変化する例)
・SDS入り
・Gel Loading Dye, Purple (6X) (NEB, B7024A):0..08% SDS
・10x Loading Buffer (TaKaRa, 9157):0.09% SDS
・SDS無し
・BlueJuice Gel Loading Buffer (10X) (Invitrogen)
・6x Loading Buffer (TaKaRa, 9156)
方法
1.次の試薬を混ぜる
DNA
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適量
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制限酵素
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計0.5ul以下
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10x 制限酵素バッファー
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1ul
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MilliQ
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up to 10ul
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Total
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10ul
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2. 制限酵素に適した温度、時間でインキュベート