Elute Buffer調製
1. 次の試薬を混ぜる。
|
| 終濃度 |
| 1M HEPES-KOH (pH 7.5) | 1ml | 20mM |
| 3M KCl | 2.5ml | 150mM |
| 0.5M EDTA (pH 8.0) | 20ul | 0.2mM |
| Glycerol | 5ml | 10% |
| 超純水 | 41.48ml |
|
|
|
|
| Total | 50ml |
|
2. 使用直前に、次の試薬を加える。
・50mlあたり、Aprotinin 71.5ul、10mg/ml Leupeptin 50ul、100mM PMSF 500ul
・10mlに対し、cOmplete Mini, EDTA-free (Roche, 11836170001) 1粒
・50mlに対し、cOmplete (Roche, 12780800) 1粒