full-length SREBF1　共免疫沈降　実験1

細胞：HEK293T(1.5 x 10^6/10cm→19hr後、80% confluent)
トランスフェクション
　・プラスミド：3.75ug each
　　・pcDNA3.1-FLAG
　　・pcDNA3.1-FLAG-mnSrebf1
　　・pcDNA3.1-FLAG-mSrebf1
　　・pcDNA3.1-mArmc5-myc-His
　・lipofectamine 2000：20ul
　・時間：5hr
培養時間：トランスフェクションから31hr
蛋白調製
　・RIPA 500ul
免疫沈降
　抗体
　　・FLAG beads, 2hr
　　・anti-SREBF1(2A4) (Santa Cruz, sc-13551, L1619), 2ug, 2hr→Dynabeads Protein G, 90min
　洗浄：4回
Western blot
　・ゲル：7.5%
　・一次抗体：4℃, over night
　　・anti-FLAG, 1/2000希釈
　　・anti-Myc, 1/1000希釈
　　・anti-ARMC5 (Novus, NBP1-94024, F118163), 1/1000希釈
　・二次抗体：anti-Rabbit (GE, NA934V)