H2O2の過酸化脂質に対する作用

実験1
　細胞：3T3-L1 (Day7, 85%分化)
　処理条件
　　・H2O2は購入後1ヶ月経過したものを使用。
　　・PBS(-)で2回wash→8mM H2O2/PBS(+), 1.5hr
　TBARS測定条件
　　・95℃, 60min
　8-isoprostane測定条件
　　・EIA Buffer 2mlに溶解/抽出効率補正なし



実験2
　細胞：3T3-L1 (Day16, 95%分化)
　処理条件
　　・PBS(-)で2回wash後添加
　　・H2O2 (nacalai, 18411-25)を購入直後に使用。
　　・条件1：PBS(+), 1.5hr
　　・条件2：2mM H2O2/PBS(+), 1.5hr
　　・条件3：4mM H2O2/PBS(+), 1.5hr
　　・条件4：8mM H2O2/PBS(+), 1.5hr
　　・条件5：16mM H2O2/PBS(+), 1hr→80mM H2O2/PBS(-), 30min
　　・条件6：32mM H2O2/PBS(+), 1hr→320mM H2O2/PBS(-), 30min
　サンプル処理条件
　　・上清：sonication(-)/アルカリ処理(+)/固相抽出(+)/EIA Buffer 500ulに溶解/抽出効率補正なし
　　・細胞：sonication(+)/アルカリ処理(+)/固相抽出(+)/EIA Buffer 1500ulに溶解/抽出効率補正なし