〇細胞免疫染色 共焦点レーザー顕微鏡 セルデスク 蛍光標識一次抗体を用いる場合
1. 蛍光標識一次抗体を10% goat serum/0.1% PBST 250ulで希釈してウェルに加え、シールして遮光し、4℃, over night。
2. (必要に応じ)抗体希釈液を回収し、10%アジ化ナトリウム2.5ulを加え、4℃で保存。
3. 10mM DAPI (AAT Bioquest, 17507)を0.1% PBSTで1000倍希釈し、250ulを加え、遮光して5min。
4. 0.1% PBST 500ulを加え、遮光して5min x 4回
5. MASコートスライドグラス(Matsunami, MAS-01)にFluoromount/Plus (Diagnostic Biosystems, K048-S) 8ulを滴下する。
6. セルデスクLF1を、ピンセット(メンブレンピンセットではない)でつまみ上げ、水気を除き、つまみをハサミで除き、裏返してスライドグラスに乗せ、遮光してover night。
7. セルデスクの表面を、70%エタノールで拭く。
8. 共焦点顕微鏡で観察する。