〇一般的な免疫沈降 sepharose使用
1. Protein G sepharose 4 Fast Flow (GE, 17-0618-01) 10-20ulをTNEで洗浄する(結合容量18ug/ul)
2. 先切れチップを用い、蛋白溶液にsepharoseを加える
3. rotation, 4℃, 1-2hr。
4. 遠心1000g, 4℃, 1min (15mlチューブは2min)し、26G針を先につけたアスピレーターでアスピレート。
5. TNE 500ulを加え、タッピングし、遠心1000g, 30sec,
4℃し、26Gアスピレーターでアスピレート
6. 操作7をさらに3回繰り返す
7. 1xサンプルバッファー40-60ulを加え、インキュベート95℃,
5min。
8. 1000g, 4℃, 1minし、上清を回収(-30℃に保存可)