Kdm1aノックダウン 実験1

細胞:3T3-L1 (Day4, 100%分化)
処理条件:siRNA reverse transfection→23時間後、培地交換(抗生物質(-))±プラスミド導入→24時間後回収
siRNA導入条件
 siRNA
  ・negative:AllStars Negative Control siRNA (QIAGEN, 1027280)
  ・Nampt:Mm_Pbef1_5 (QIAGEN, SI02674329)
  ・Kdm1a-1:Mm_Aof2_1 (QIAGEN, SI00233436) (AGGCTTGGACATTAAACTGAA)
  ・Kdm1a-3:Mm_Aof2_3 (QIAGEN, SI00233450) (ACGAGTTGCTACATTTCGAAA)
  ・Kdm1a-4:Mm_Aof2_4 (QIAGEN, SI00233457) (AAGCAAGCTCTTCTAGCAATA)
  ・Kdm1a-5:Mm_Aof2_5 (QIAGEN, SI02676562) (TGCAAGGAATATGATGAATTA)
 トランスフェクション
  ・siRNA量:60pmol
  ・Lipofectamine RNAiMAX Reagent量:2ul
  ・総Opti-MEM量:200ul
  ・培地:抗生物質(-)
プラスミド導入
 ・レポーター:3xSRE-Luc, 100ng
 ・発現プラスミド
  ・CMV7, 300ng
  ・CMV-Srebp1a, 300ng