〇形質転換 カナマイシン耐性プラスミド
1. LBプレート(Km+)を室温に置いておく。
2. コンピテントセルを氷上で溶かす。
3. DNA溶液をコンピテントセルに加え、on ice, 15min (DNA溶液量はコンピテントセルの半分以下にする)。
4. 42℃, 50secし、on ice 2min。
5. LB or SOCを9倍量以上加え、37℃で50-80minインキュベート。
6. 10-100ulをプレートに加える。全量を加える場合は、遠心8000g, 4℃, 1minし、100ulを残して上清を除く。
7. エタノールに浸してライターで炙ったコンラージ棒で塗り広げる。
8. 37℃, 9hr-14hr or 33℃, 24hr or 室温, 48hrでインキュベート。