〇LightCycler 96 System　FastStart Essential DNA Green Master

1. LightCycler 96 Systemを予約する。
2. 以下の試薬を混ぜる。

FastStart Essential DNA Green Master	10ul
50uM Primer F	0.2ul
50uM Primer R	0.2ul
超純水	7.6ul
Total	18ul

3. LightCycler 480 Multiwell Plate 96, white (Roche, 04729692001)に室温で分注する。
4. cDNA 2ulを加える。
5. シールし、遠心3分以上。
6. 機械にセットする。
7. NEW→New experiment based on Roche Template→鉛筆マーク→RunTemplate_SYBR_Amp_Melt
8. ファイル名入力→Create→Profile→以下の様に項目を修正→Start

95℃	600sec
95℃	10sec	↓
60℃	15sec
72℃	30sec 1sec/10bp (>10sec)	↑45 Cycle

9. Overview→ファイルを選ぶ。
10. USBを挿す→Synchronize→抜く
11. Eject→Exit
12. LightCycler 96 Softwareでファイルを開く。
13. 不要なウェルをClear Wellsで除く。
14. Gene、Type、Concentrationを入力
15. Analysis→Add Analysis→OK
16. 増幅効率を算出する(50*10^(-1/Slope))
17. Position→データをExcelにコピーペースト。