〇oligonucleotideのリン酸化/アニーリング　2ステップ法

1. 次の試薬を混ぜる

2.5uM oligonucleotide	2ul
10x T4 Polynucleotide Kinase Buffer (TaKaRa)	1ul
10mM ATP	1ul
T4 Polynucleotide Kinase (TaKaRa, 2021)	1ul
MilliQ	5ul
Total	10ul

2. 37℃で50min-1hrインキュベート
3. 次の試薬を混ぜる

リン酸化oligonucleotide sense鎖	10ul
リン酸化oligonucleotide antisense鎖	10ul
4M NaCl	2.5ul
MilliQ	27.5ul
Total	50ul

方法1
4. ProFlex PCR Systemに移動
5. New Method→Open Template→General PCR→Manage Steps
6. Advanced Options→Ramp Rates→0.1℃/sec→Choose Block→Blockを選択→Start Run

方法2
4. ヒートブロックで95℃, 5min
5. ヒートブロックの電源を切り、室温近くまで徐冷する(-30℃で保存可)