〇oligonucleotideのリン酸化/アニーリング　1ステップ法

1. 次の試薬を混ぜる。

10uM oligonucleotide F	2.5ul	5ul
10uM oligonucleotide R	2.5ul	5ul
10x T4 Polynucleotide Kinase Buffer (TaKaRa)	1ul	2ul
10mM ATP	1ul	2ul
T4 Polynucleotide Kinase (TaKaRa, 2021)	0.5ul	1ul
MilliQ	2.5ul	5ul
Total	10ul	20ul

2. 9FのProFlex PCR Systemを予約し、移動する。
3. New Method→Open Template→General PCR→Volume入力→Manage Steps→Remove Steps
4. 37℃, 30min→95℃, 5min→25℃, 1mim→15℃, ∞
5. Manage Steps→Advanced Options→Ramp Rates→25℃のStepのRamp Rateを0.2℃/secに変更。
6. Choose Block→Blockを選択→Start Run
7. 10ulに超純水990ulを加える。