血中Adipoq測定

マウス/ラットアディポネクチンELISAキット(Otsuka)を使用する場合

1. 検体希釈用原液を精製水で5倍希釈し、検体希釈液とする。
2. マウス血漿を検体希釈液で101倍希釈する(-30℃に保存可)
3. 101倍希釈検体を検体希釈液で101倍希釈し、10201倍希釈検体とする。
4. 8ng/ml標準品を検体希釈液で希釈し、8, 4, 2, 1, 0.5, 0.25, 0ng/mlの標準希釈液を調製する。
5. 洗浄用原液に精製水を24倍量加え、洗浄液とする。
6. 抗体プレートに洗浄液350ulを加え、逆さにして液を捨て、キムタオルに5回程叩きつける
7. 標準希釈液、検体希釈液100ulを加え、プレートシールを貼り、室温1hr
8. 洗浄液350ulで3回洗浄する。
9. ビオチン標識抗体液100ulを加え、プレートシールを貼り、室温1hr
10. 洗浄液350ulで3回洗浄する。
11. 酵素標識ストレプトアビジン原液を200倍量の酵素標識ストレプトアビジン希釈液で希釈する。
12. 酵素標識ストレプトアビジンを100ul加え、プレートシールを貼り、室温1hr
13. 洗浄液350ulで3回洗浄する。
14. 基質液Aと基質液Bを1：1の割合で混ぜ、100ul加え、室温15min
15. 反応停止液100ulを加え、450nmで吸光度を測定する。