PHF2の抗体架橋による免疫沈降

結論
 ・anti-PHF2抗体は抗体架橋しても免疫沈降に使える

細胞:3T3-L1 adipocyte (Day3, 80%分化), 10cm dish 1/2枚
トランスフェクション
 plasmid:pcDNA-FLAG-HA-human蛋白P 12ug
 lipofectamine 2000:30ul
 細胞回収までの時間:46hr
免疫沈降
 方式:抗体架橋
 抗体
  ・rabbit IgG, 3ug
  ・anti-human蛋白P, 3ug
SDS-PAGE
 ローディング量:10cmディッシュ1/18枚分
ウェスタンブロット
 一次抗体:rabbit anti-FLAG (Sigma, F7425), 1/1000希釈
 二次抗体:anti rabbit Ig (Dako, P0448), 1/3000希釈
 発色液:Pierce ECL
 コンタクト時間:30min