〇細胞蛋白抽出 RIPA Buffer 3T3-L1脂肪細胞 10cm

1. 遠心機を4℃に冷やしておく。
2. 培地をアスピレートし、PBS 5mlでwashする。
3. 冷やしたRIPA Buffer (proteinase inhibitor +) 1mlを加え、セルスクレイパーで1.5mlチューブに回収し、on ice。
4. 1.5mlチューブ2本に分注し、Output 3でsonication 10回。
5. 12000g, 4℃, 10min遠心し、中間層を回収する。
6. (必要に応じ) 蛋白定量する。
7. 4xサンプルバッファー 30ulを加え、インキュベート95℃, 5min (-30℃に保存可)。