〇細胞蛋白抽出　TNE Buffer　HEK293T　9cm dish

1. 遠心機を4℃にしておき、氷、液体窒素、1.5mlチューブ、セルスクレイパーを用意する。
2. PBSを調製する。
3. 培地をアスピレートし、PBS 1mlを加え、冷蔵庫に入れる。
4. 細胞をセルスクレイパー(もしくはピペッティング)でエッペンに回収し、on ice。
5. 遠心400g, 4℃, 5minし、上清を除く。
6. PBS 1mlを加え、タッピング。
7. 遠心400g, 4℃, 5minし、上清を除き、on ice (液体窒素→-80℃で保存可)
8. 冷やした蛋白分解阻害剤入りTNE 500ul-1mlを加え、ピペッティングし、rotation, 30min-1hr, 4℃
9. 遠心12000g, 4℃, 15minし、上清を回収する。
10. (Western blotに使う場合は) サンプルバッファーを加え、イ ンキュベート95℃, 5min (-30℃に保存可)。