〇siRNA導入 Reverse transfection H295R細胞 6cm dish Trypsin/EDTA使用

1. P20、P200、P1000チップを、蓋を開けてUVで10min以上。
2. P20、P200、P1000ピペットマンをUVで10min以上。
3. 次の試薬を混ぜ、タッピング。
Opti-MEM 1000ul
10uM siRNA 6ul


Total
1006ul
4. Lipofectamine RNAiMAX Reagent 15ulを加え、タッピングし、10-20min静置し、6cm dishに加える。
5. H295R (10cm dish)をトリプシン/EDTAで処理して中和し、遠心し、培地(抗生物質(-)) 8mlを加える。
6. ピペッターを底につけ、圧力をかけながらピペッティング5回し、培地をメスアップする。
7. 培地(抗生物質(-))を適量加え、6cm dishに4ml加える。