〇siRNA導入 Reverse transfection H295R細胞 6cm dish Accutase使用

1. P20ピペットマンとP20用チップを、蓋を開けてUVで30min。
2. 次の試薬を混ぜ、タッピング。
Opti-MEM 1000ul
100uM siRNA
0.6ul


Total
1000.6ul
3. Lipofectamine RNAiMAX Reagent 15ulを加え、タッピングし、10-20minインキュベートし、6cm dishに入れておく。
4. H295R (10cm)の培地をアスピレートし、Accutase 1.5mlを加え、剥がれるまで待つ。
5. 培地(抗生物質(-)) 2.5mlを加え、50mlチューブに回収する。
6. ピペッターを底につけ、圧力をかけながらピペッティング5回。
8. 培地(抗生物質(-))を適量加え、6cm dishに4mlを加える。