〇siRNA導入　Reverse transfection　H295R細胞　12/24well　Lipofectamine RNAiMAX

12well【24well】

1. 1.5mlチューブ or 2mlチューブ(Eppendorf, 0030120.094)にラベルし、蓋を開け、UVで10min以上。
2. P20、P200、P1000チップを、蓋を開けてUVで10min以上。
3. P20、P200、P1000ピペットマンをUVで10min以上。
4. 次の試薬を混ぜ、タッピング。

	12well	24well
Opti-MEM	200ul	100ul
10uM siRNA	1.2-6ul	0.6-3ul

5. Lipofectamine RNAiMAX Reagent 2-3ul【1-1.5ul】を加え、タッピングし、10-20min静置し、ウェルに加える。
6. H295R (10cm)をトリプシン/EDTAで処理して中和し、遠心し、培地(抗生物質(-)) 8mlを加える。
7. ピペッターを底につけ、圧力をかけながらピペッティング5回。
8. 培地(抗生物質(-))を適量加え、ウェルに1ml【500ul】加える。