〇siRNA導入 Reverse transfection 3T3-L1脂肪細胞 12ウェル
1. 3T3-L1脂肪細胞10cm 1枚を準備する。
2. 次の試薬を混ぜる。
Opti-MEM
50ul
10uM siRNA
1-6ul
3. 次の試薬を混ぜる。
Opti-MEM
50ul
Lipofectamine RNAiMAX Reagent
2-3ul
4. 手順2の溶液と手順3の溶液を混ぜ、5minし、12ウェルプレートに加える。
5. 抗生物質(-)の培地で細胞を、12ウェルプレート1/2-1枚に、メディウム2mlに対しピペットマンで30回ピペッティングし、継代する。
6. 4-24時間後、抗生物質(+)に培地交換する。