〇siRNA導入 Reverse transfection 3T3-L1脂肪細胞 6ウェル
1. 1.5mlチューブを、蓋を開け、UVで10min以上。
2. ピペットマンチップを、蓋を開け、UVで10min以上。
3. ピペットマンをUVで10min以上。
4. 培養液、PBS、Trypsin/EDTAを温める。
5. 次の試薬を混ぜる。
Opti-MEM
100ul
10uM siRNA
6ul
6. 次の試薬を混ぜる。
Opti-MEM
100ul
Lipofectamine RNAiMAX Reagent
6ul
7. 手順4の溶液と手順5の溶液を混ぜ、5minし、6ウェルプレートに加える。
8. 抗生物質(-)の培地で3T3-L1脂肪細胞10cm 1枚を、圧力ピペッティング5回行い、6ウェルプレート1枚に継代する。