〇Srebf1ノックダウン　3T3-L1　実験2

Reverse transfection
　細胞
　　・3T3-L1 adipocyte (分化停止後2日目, 99%分化)
　　・10cm x 1枚→6well x 1枚
　siRNA：60pmol/well
　　・AllStars Negative Control siRNA (Qiagen, 1027280)
　　・Mm_Srebf1_1 (Qiagen, SI01433103)
　RNAiMAX：6ul/well
　培養時間：52hr
蛋白抽出：RIPA, 200ul
ウェスタンブロット
　ゲル
　　・SREBF1：7.5%
　　・ACTB：5-20%
　一次抗体：4℃, over night
　　・anti-SREBF1(2A4) (Santa Cruz, sc-13551, L1619), 1/200希釈
　　・anti-Actb (Sigma, A5441), 1/5000希釈
　二次抗体：anti-mouse Ig, 1/2000希釈