3T3-L1脂肪細胞におけるCat過剰発現 実験1
薬剤誘導性3T3-L1作製
一次感染
細胞:3T3-L1
ウイルスベクター:pRetroX-Tet-On Advanced
selection:800ug/ml G418
二次感染
ウイルスベクター
・blank:pRetroX-Tight-Pur
・Cat:pRetroX-Tight-Pur-mCat(T72A/T734C/C1356T/C1392T/C1503T)
selection:5ug/ml puromycin + 400ug/ml G418
maintenance:2ug/ml puromycin + 400ug/ml G418
薬剤による発現誘導
細胞:分化誘導後4日目。95%分化
Doxycycline処理条件:5ug/ml, 19hr
