3T3-L1脂肪細胞におけるCat過剰発現 実験1

薬剤誘導性3T3-L1作製
 一次感染
  細胞:3T3-L1
  ウイルスベクター:pRetroX-Tet-On Advanced
  selection:800ug/ml G418
 二次感染
  ウイルスベクター
   ・blank:pRetroX-Tight-Pur
   ・Cat:pRetroX-Tight-Pur-mCat(T72A/T734C/C1356T/C1392T/C1503T)
  selection:5ug/ml puromycin + 400ug/ml G418
  maintenance:2ug/ml puromycin + 400ug/ml G418
薬剤による発現誘導
 細胞:分化誘導後4日目。95%分化
 Doxycycline処理条件:5ug/ml, 19hr