組織DNA濃度測定

CellTox Green Cytotoxicity Assay (Promega, G8741)を使用する場合

1. 10ng/ul Lambda DNA 0、2.5、5、7.5、10ulをLysis Bufferで50ulにメスアップし、0, 0.5, 1, 1.5, 2ng/ulのstandardとする。
2. (必要に応じて)tissue lysateをMilliQで希釈する。
3. tissue lysateをLysis Bufferで10倍以上希釈し、50ulにする。
4. Dye solutionを調製する。
5. Dye solutionを標準品、サンプルに50ulずつ加え、vortexし、R.T., 15min。
6. 70ulをblack plate (Thermo, 137101)に分注する。
7. SH-9000Labを起動する→リセット→測定条件作成→励起490nm/測定525nmで測定
8. 検量線(一次曲線)から、手順3のサンプル濃度(ng/ul)を算出する。
9. 手順2、3の希釈倍率を掛け算し、原液の濃度(ng/ul)を算出する。
10. tissue lysateの希釈倍率を掛け算し、単位組織重量当たりの濃度(ng/mg or ug/mg)を算出する。

蛋白濃度との相関