Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit 通常法 oligo dTとrandom hexamerを用いる場合

1. 次の試薬を氷上で混ぜる
RNA
900ng 以下
Anchored-oligo[dT]18 Primer 1ul
Random Hexamer Primer
2ul
H2O, PCR grade
up to 13ul


Total
13ul
2. サーマルサイクラーで65℃, 10min→4℃
3. 次の試薬を加える
Transcriptor RT Reaction Buffer (5x) 4ul
Deoxynucleotide Mix 10mM each 2ul
Protector RNase inhibitor 0.5ul
Transcriptor Reverse Transcriptase 0.5ul


Total
7ul
4. キャップを新しいものと交換し、25℃, 10min→50℃, 60min→85℃, 5min→4℃
5. MilliQ 20-60ulを加え、キャップを新しいものと交換する(-30℃に保存可)。