ウェスタンブロット発光

Pierce ECL Plus Western Blotting Substrate

Amersham ECL Western Blotting Detection Reagents (GE, RPN2209)で検出する場合
1. Detection Reagent 1とDetection Reagent 2を等量ずつ混ぜる
2. パラフィルムの上に混合溶液1mlを乗せ、メンブレンの表を下にして乗せる
3. インキュベート1min
4. 現像カセットを70%EtOHで少し濡らしてからラップを敷き、メンブレンを乗せ、上からラップを被せる
5. 暗室に行き、X-Ray film A plus (Konica Minolta)の角を切り、コンタクトし、現像する
6. フィルムをメンブレンに重ね、マーカーの位置に印をつける
7. バンドが薄い場合は、0.1%TBSTで5min, 2回washし、より感度の高い検出液で検出する

Pierce ECL Western Blotting Substrateで検出する場合
1. Detection Reagent 1とDetection Reagent 2を等量ずつ混ぜる
2. 現像機の電源を入れる
3. パラフィルムの上に混合溶液1mlを乗せ、メンブレンの表を下にして乗せる
4. インキュベート1min
5. 現像カセットを70%EtOHで少し濡らしてからラップを敷き、メンブレンを乗せ、上からラップを被せる
6. 暗室に行き、X-Ray film A plus (Konica Minolta)の角を切り、コンタクトし、現像する
7. フィルムをメンブレンに重ね、マーカーの位置に印をつける
8. バンドが薄い場合は、0.1%TBSTで5min, 2回washし、より感度の高い検出液で検出する

SuperSignal West Femto Maximum Sensitivity Substrate (Thermo Scientific, 34095)で検出する場合
1. Stable Peroxide BufferとLuminol/Enhancer Solutionを等量ずつ混ぜる
2. 現像機の電源を入れる
3. パラフィルムの上に混合液1mlを乗せ、メンブレンの表を下にして乗せる
4. インキュベート5min
5. 現像カセットを70%EtOHで少し濡らしてからラップを敷き、メンブレンを乗せ、上からラップを被せる
6. 暗室に行き、X-Ray film A plus (Konica Minolta)の角を切り、コンタクトし、現像する
7. フィルムをメンブレンに重ね、マーカーの位置に印をつける