マウス由来細胞へのレトロウイルス感染

1. Plat E 6cmディッシュ1枚に、ウイルスベクター8ug + lipofectamine 2000 20ul or ウイルスベクター5ug + lipofectamine 3000 10ulを用い、トランスフェクションす る。
2. 翌日(Day1)に培地を回収しながら交換し、回収した培地はフィルターで濾過し、4℃に保存する。
3. Day2 (止むを得ない場合はDay3)に培地を回収し、回収した培地はフィルターで濾過する。
4. 分裂細胞10cm dish 3枚に、手順2で回収したウイルス液、手順3で回収したウイルス液、通常培地(コントロール用)4mlを1枚ずつ加え、10mg/ml polybreneを14ul加える。

G418でselectionする場合
5. 翌日、培地交換or継代を行い、50mg/ml G418 (ナカライ, 16513-84)を終濃度400-800ug/mlとなるように加える。
6. 一日おきにG418入り培地で培地交換or継代

puromycinでselectionする場合
5. 翌日、培地交換or継代を行い、1mg/ml puromycinを終濃度5ug/mlとなるように加える。
6. 一日おきにpuromycin入り培地で培地交換or継代

3T3-L1へのレトロウイルス感染